目前市場上的大鼠ELISA試劑盒既有國產(chǎn)品牌,也有進口品牌,數(shù)量眾多,令人眼花繚亂,如何選擇最合適的產(chǎn)品呢
一、大鼠ELISA試劑盒的組成結構:
1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱量和的試管。收集血液后,000*g離心0分鐘將血紅細胞迅速小心的分離。
2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液:000×g離心0分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。000×g離心0分鐘,取上清液。
5、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

二、大鼠ELISA試劑盒的注意事項:
1、試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2、豬ELISA試劑盒實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
7、加入試劑的順序,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
8、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
三、大鼠ELISA試劑盒的操作方法:
1.包被:在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。
2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,然后洗滌。
3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體0.ml。
4.加底物液顯色:于各反應孔中加入底物溶液0.ml,37℃0~30分鐘。
5.終止反應:于各反應孔中加入酸0.05ml。
6.結果判定:豬ELISA試劑盒可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或較淺,依據(jù)所呈顏色的深淺。
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